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制作优质

HE

病理组织切片的要素

作者：王晓鸿

曹婉维

来源：《中国实用医药》

2011

年第

06

期

【摘要】

目的

制作一张优质的病理组织切片。方法

对病理组织制片过程中出现的问题加

以注意及改进。结果

病理组织固定、脱水效果好，制作的组织切片薄，

HE

染色胞浆分明。

【关键词】

病理组织；取材；脱水；切片；

HE

染色

病理组织石蜡制片技术是病理诊断的基础，制片质量的好坏是指导医师作出准确诊断的重

要保证。常规石蜡制片一般经过取材、固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色、封片等

一系列的步骤，一个步骤做不好都会影响组织切片的质量。本文就我们科在日常工作中各步骤

可出现的问题总结出一些经验和体会，现介绍如下。

        1 

材料

        1.1 

各类病理组织标本

        1.2 

仪器

 SHANDON-Thermo

全封闭式组织处理机、包埋机、切片机。

        1.3 

试剂

 10%

福尔马林、

AAF

固定液、梯度酒精、二甲苯、石蜡

(58~60

℃

)

、苏木素、伊红

        2 

方法

        2.1 

取材

临床医师切取标本后，应尽快将标本置于

10%

福尔马林液内固定，固定液量为

4~5

倍于标本体积，也可达到

15~20

倍。对较大的标本应切开固定，切开厚度为

1 cm

左右，

为保存标本的原有大体形态，切开时最好不要完全断开。固定时间应视标本大小而定，小标本

应不少于

4 h

，大标本应不少于

8 h

。取材组织面积为

2 cm×

1.5 cm

，厚度不超过

0.3 cm

，骨组

织或钙化组织需先经

10%

硝酸水溶液脱钙至针刺入无阻力感后再取材。

        2.2 

脱水

标本放入全封闭式组织处理机后，

AAF

固定液

1 h→80%

酒精

30 min→90%

酒精

30 min→95%

酒精Ⅰ

1 h→95%

酒精Ⅱ

1 h→

无水乙醇Ⅰ

1 h→

无水乙醇Ⅱ

1 h→

无水乙醇Ⅲ

1.5 h→

二甲苯Ⅰ

30 min→

二甲苯Ⅱ

1 h→

石蜡Ⅰ

30 min→

石蜡Ⅱ

30 min→

石蜡Ⅲ

1 h→

石蜡Ⅳ

1.5 h

。

        2.3 

包埋

将脱水后的组织按不同要求用石蜡

(58

℃

~60

℃

)

进行包埋。

        2.4 

切片

将冷却的蜡块放于切片机上切片，厚度一般为

3~4 μm

。

        2.5 

染色

石蜡切片脱蜡至水

→

放入苏木素工作液内染色

1~5 min→

自来水洗

1 min→1%

盐

酸酒精分化

10 s→

自来水洗

1 min→

稀氨水

(1%)

反蓝

20 s→

自来水洗

1 min→95%

酒精

10 s→

乙